人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3含量检测,人AFP-L3 ELISA检测试剂盒

ELISA的血样本在收集、处理和保存方面要考虑的几个问题

(1)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。

(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染。一是细菌的生长所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二是一些细菌的内源性酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。

(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2～8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。

(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。

(5)要注意避免出现溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,如血清标本中血红蛋白浓度较高,就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。

ELISA试剂盒的实践技巧：
 1. 操作前应对实验的物理参数有充分的了解，如环境温度(保持在18 C～25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等，要先查看水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。
 2. 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次序要与说明书一致，否则可导致结果错误，实验重复性差。
3. 手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗涤次数不要超过说

明书**的洗涤次数，洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，造成孔问污染，导致假阴性或假阳性。
4. 要保证加液量一致ELISA试剂盒我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量不准，造成显色不统一，判断错误。
 5. 显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，以免显色过强。