SH30074.03 马血清

1、细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?

一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。

如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：

(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;

(2)血清质量不好，反复冻融的结果;

(3)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;

(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;

(5)培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

2、 细胞培养中如何防止黑点生成?

(1) 尽可能地减少血清冻融次数。

(2) 培养基无需37℃水浴。

(3) 培养基保持**PH值7.0- 7.2。

(4) 严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。

(5) 掌握细胞传代的**时机，细胞切勿生长过老。