大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒说明书

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 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒说明书
Rat Bromodeoxyuridine,BrdU ELISA Kit 

 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒说明书用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为110μgml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml4℃一夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)

  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)

  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml37℃孵育0.51小时,洗涤。

  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml371030分钟。

  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性

 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA检测试剂盒说明书 

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