IGFBP-2 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2ELISA试剂盒

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IGFBP-2 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2ELISA试剂盒

北京方程佰金ELISA实验的基本操作流程

1. 包被ELISA板子或使用商品化ELISA板。
 2. 加待检样品:使之与固相抗体/抗原反应一段时问,让标本中的抗原/抗体与固相载体上的抗体/抗原结合,形成固相复合物。
 3. 加酶标抗体:使固相复合物与酶标抗体结合。
 4. 加底物:夹心式复合物中的酶催化底物成为有色产物。根据颜色反应的程度进行抗原/抗体的定性或定量 me-g :aH` st;(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;

IGFBP-2 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2ELISA试剂盒

ELISA的基本原理有三条:

    (1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;

    (2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;

(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。

测试剂盒检测原理

  ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与**次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。 

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