《冬青树》为冬青科冬青属常绿乔木,冬青球不仅具有较高的园林绿化观赏价值,而且具有一定的药用价值。由于冬青种子发芽率低,且种子繁殖易分离而不能有效保持亲本优良特性;加之扦插生根率低且插穗有限;而通过组织培养繁殖则能够克服以上问题。本试验系统研究了冬青离体培养及**繁殖各个阶段的影响因子,为冬青种苗工厂化生产提供参考。并且通过环境调控对提高冬青组培苗的光合自养能力进行了研究,即进行光自养培养,探讨了环境调控对冬青组培苗的生长发育的影响。
研究结果如下: 对冬青无菌体系的建立进行了研究,灭菌剂HgCl_2灭菌时间以15min为**,时间过长,容易造成外植体或组织伤害过大,后期培养出现褐化死亡,时间在10min时,灭菌效果不佳。以冬青茎段为外植体,接种茎段长度以1.0cm为适宜,外植体过大或过小均不能达到理想灭菌效果和提高冬青外植体利用率。
在光合自养培养中,以冬青无菌苗为材料研究组培苗的光合自养培养条件,设置不同的CO_2浓度和光合光量子通量密度(PPFD)进行环境调控处理。并配以培养基中不同的蔗糖浓度,对不同处理的冬青组培苗的叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜、可溶性糖、可溶性蛋白、鲜重增加量、干重和根系活力等生理指标进行测定。结果表明环境调控能促进冬青组培苗的生长发育,提高光合自养的能力。培养基中糖浓度对冬青组培苗也有影响,但配以光自养调控设施处理,可以减少蔗糖的用量,而到达理想的效果,CO_2浓度过高,部分生理指标开始下降。